Immunologie

 

Certaines biothérapies comme la vaccination visent à obtenir une activation du système immunitaire, alors que d’autres, telles que la thérapie génique, cherchent à prévenir le déclenchement de celle-ci. Dans tous les cas, il est crucial d’évaluer et caractériser la réponse immune.

GenoSafe propose des tests permettant le suivi de la réponse immune chez les animaux lors des étapes précliniques ou chez les patients enrôlés dans les essais cliniques:

 

Mesure de cytokines, chemokines et facteurs de croissance

Aujourd’hui, nous disposons de techniques permettant de quantifier des cytokines et autres analytes de manière rapide, précise et non coûteuse à partir d’échantillons biologiques et de surnageant de cellules.

En fonction des caractéristiques et paramètres de votre projet, nous réalisons votre étude avec une ou deux approches techniques :

  • Enzyme Linked Immunosorbent  Assays (ELISA) à l’aide de kits commerciaux
  • Des analyses en multiplexage qui permettent la mesure d’un grand nombre d’analytes dans un faible volume dans un format de plaque 96 puits (BioPlex 200 System combiné à la technologie xMAP, Luminex®).

Détection des anticorps circulants

La mesure de la production d’anticorps en réponse à la présence d’antigène est essentielle à l’évaluation de la réponse humorale. La méthode est basée sur une liaison spécifique entre un antigène et les anticorps présents dans le plasma/sérum pour déterminer un « titre » en anticorps spécifiques d’un antigène.

Nous proposons des solutions pour répondre à vos besoins, principalement basé sur le test  ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay), la méthode la plus couramment utilisée pour ce type d’analyse.

Mesure des facteurs/ Anticorps neutralisants anti-virus/vecteur

Les facteurs/anticorps neutralisants bloquent l’entrée de virus dans les cellules. Ce phénomène est recherché dans une approche de vaccination alors qu’il n’est pas souhaitable dans le cas d’une thérapie génique utilisant un vecteur viral.

GenoSafe propose des tests de neutralisation pour quantifier le titre en anticorps neutralisants spécifiques de virus/vecteurs, avant et après traitement.

Réponse immune cellulaire

L’activation des lymphocytes T après administration d’antigènes entraine généralement une sécrétion de cytokines qui participent à la mise en place de la réponse immune.

Les réponses immunes de type cellulaire déclenchées par l’administration de produits de vaccination ou de thérapie génique peuvent être caractérisées/quantifiées par ELISpot (Enzyme-Linked ImmunoSpot). Cette méthode sensible dérivée de la méthode ELISA permet de détecter et de déterminer la fréquence de cellules sécrétrices de cytokines (ou autres protéine).

Plateforme

Spectrophotometre

AAV, Lentivirus, Plasmid, CRISPR, CarT Cells

Plateforme MSD

ImmunoSpot S6 Core Analyzer

LSRII

FC500

Cytoflex

ImageStream

Victor X- luminescence

Plateforme Odyssey

Focus : AAV

Un problème majeur rencontré lors du transfert de gène médié par les vecteurs AAV est la réponse immune dirigée contre le vecteur et/ou contre le produit du transggène. Le suivi de la réponse immune (inflammatoire, de type humorale ou cellulaire) est essentiel pour évaluer la sécurité des vecteurs AAV. A GenoSafe nous avons implémenté une large gamme de solutions pour évaluer ces réponses immunes.

La réponse immune spécifique des vecteurs AAV est principalement de type humorale. Il est aujourd’hui largement décrit qu’il y a une forte prévalence aux vecteurs AAV chez l’Homme et dans diverses espèces du fait de l’exposition au virus sauvage.  Il est par conséquent recommandé de suivre le niveau d’anticorps neutralisants avant et après administration du médicament de thérapie génique au cours d’un essai clinique.

En plus de la réponse humorale, il est également important d’envisager la réponse cellulaire.

Les solutions suivantes sont disponibles à GenoSafe :

• Détection des facteurs neutralisant anti-AAV
Méthodes disponibles pour les sérotypes: 1, 2, 5, 6, 8, et 9.
Espèces: Humain, Primates non-humains. Les méthodes sont aisément adaptables à d’autres espèces (rongeurs, chien, …).

• Détection de sous-classes d’immunoglobuline circulantes anti-AAV
Méthodes disponibles pour les sérotypes: 1, 2, 5, 6, 8, et 9.
Espèces: Humain, Primates non-humains. Les méthodes sont aisément adaptables à d’autres espèces (rongeurs, chien, …).

• Détection de la réponse spécifique des lymphocytes T par ELISpot IFN-γ
Méthodes disponibles pour les sérotypes: 1, 2, 5, 6, 8, and 9.
Espèces: Humain et primates non-humains.